文 | 氨基觀察
2025年，一場關(guān)于“體內(nèi)編程”的細(xì)胞治療革命，正在醞釀。
過去十年，CAR-T療法改寫了血液腫瘤治療史，但其百萬高價、漫長制備周期和復(fù)雜供應(yīng)鏈，始終是懸在商業(yè)化頭頂?shù)倪_(dá)摩克利斯之劍。
如今，一股新勢力正試圖改變這些難題——體內(nèi)CAR-T（in vivo CAR-T），通過基因遞送技術(shù)直接在患者體內(nèi)“改造”T細(xì)胞，無需體外分離、擴(kuò)增和回輸，將治療流程從數(shù)周壓縮至數(shù)天，成本也有望大幅下降。
今年3月，阿斯利康豪擲70億元收購體內(nèi)細(xì)胞療法公司EsoBiotec，徹底點(diǎn)燃行業(yè)熱情。Capstan、Umoja、Interius等海外biotech競相推進(jìn)管線，云頂新耀、科濟(jì)藥業(yè)等國內(nèi)玩家亦加速布局。據(jù)不完全統(tǒng)計，全球已有超20個體內(nèi)CAR-T項目處于臨床前或臨床早期，靶向CD19、BCMA，且不止血液瘤，還向?qū)嶓w瘤、自免疫病延伸。
盡管這一前沿技術(shù)的前路注定還有諸多坎坷與挑戰(zhàn)，如何精準(zhǔn)遞送CAR基因？如何避免脫靶風(fēng)險……但是，這代表著腫瘤治療發(fā)展的重要方向，甚至不僅僅是技術(shù)優(yōu)化，而是對整個治療模式的顛覆。
01 更快、更好、更便宜
體內(nèi)CAR-T之所以被視為一種顛覆性前沿技術(shù)，是因為其有能力通過技術(shù)創(chuàng)新，從根本上解決現(xiàn)有CAR-T療法的痛點(diǎn)。
目前，全球范圍內(nèi)及中國已上市12款CAR-T療法，無一例外均是ex vivo CAR-T，也就是需要將自體T細(xì)胞在體外經(jīng)過基因工程改造和擴(kuò)增培養(yǎng)后，再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)的細(xì)胞療法。
雖然傳統(tǒng)CAR-T療法早已在腫瘤治療效果上取得了顛覆性突破，但其整體生產(chǎn)過程復(fù)雜、周期漫長且成本昂貴，一定程度限制了其商業(yè)化進(jìn)程和患者的可及性。
對比之下，體內(nèi)CAR-T跳過了體外基因改造和擴(kuò)增步驟，直接在患者體內(nèi)生成和激活CAR-T細(xì)胞，無論是在生產(chǎn)周期、安全性還是可及性方面，都有優(yōu)勢，更快、更好、更便宜。
具體來說，體內(nèi)CAR-T療法省去了體外細(xì)胞培養(yǎng)和基因改造的復(fù)雜步驟，通過病毒載體、納米載體等遞送系統(tǒng)，把CAR基因直接遞送到患者體內(nèi)的T細(xì)胞中，實現(xiàn)在體內(nèi)進(jìn)行基因改造。相比傳統(tǒng)CAR-T的個性化、私人訂制特性，類似現(xiàn)貨型的體內(nèi)CAR-T療法，大大簡化了生產(chǎn)及治療流程。
體內(nèi)CAR-T療法不僅流程簡化，療效也有望更好，副作用更少。因為它是在患者體內(nèi)直接進(jìn)行基因改造，能更好地模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，讓改造后的T細(xì)胞能更好地適應(yīng)并攻擊腫瘤細(xì)胞。
同時，體內(nèi)CAR-T避免了體外生產(chǎn)過程中可能出現(xiàn)的細(xì)胞污染和變異風(fēng)險，患者也不需要接受化療方案進(jìn)行清淋，保持完整的免疫系統(tǒng)。
高昂的治療費(fèi)用一直是限制CAR-T療法廣泛應(yīng)用的“攔路虎”。傳統(tǒng)的CAR-T療法需要高度專業(yè)化的技術(shù)和設(shè)備，制備過程復(fù)雜又耗時，導(dǎo)致治療費(fèi)用居高不下。而體內(nèi)CAR-T療法通過簡化治療流程和優(yōu)化制備工藝，有望顯著降低治療成本。
巨大的技術(shù)發(fā)展?jié)摿?，吸引著越來越多的科學(xué)家和企業(yè)投身于體內(nèi)CAR-T的研究和開發(fā)。據(jù)不完全統(tǒng)計，全球有超過20款管線處于臨床前或臨床早期，Interius、Umoja、EsoBiotec處于第一梯隊，國內(nèi)也已有多家公司布局體內(nèi)CAR-T，包括濟(jì)因生物、遠(yuǎn)泰生物、先博生物、博生吉、云頂新耀等。
跨國大藥企也在布局體內(nèi)CAR-T療法，此前賽諾菲曾披露公司有三個體內(nèi)CAR-T項目處于臨床前開發(fā)階段，2024年1月宣布與Umoja就開發(fā)體內(nèi)CAR-T療法達(dá)成潛在總額14.4億美元的合作，安斯泰來在2月宣布與Kelonia達(dá)成合作以開發(fā)體內(nèi)CAR-T。
顯然，2024年是體內(nèi)CAR療法大跨越的一年。進(jìn)入2025年，向來看重CAR-T的阿斯利康又添了一把火。
02 技術(shù)的軍備競賽
由于體內(nèi)遞送CAR需要滿足一定的標(biāo)準(zhǔn)，包括精確的T細(xì)胞靶向、高效的基因編輯和低毒性。因此，體內(nèi)CAR-T的爆發(fā)，本質(zhì)是一場遞送技術(shù)的軍備競賽。目前的技術(shù)路線主要分為兩類，病毒載體和納米載體。
前者是利用經(jīng)過改造的、能夠特異性感染T細(xì)胞的慢病毒載體遞送CAR基因；后者則是利用脂質(zhì)納米顆粒（LNP）LNP包裹mRNA或DNA，并通過特定配體靶向遞送至T細(xì)胞。
其中，慢病毒載體在已獲批的傳統(tǒng)CAR-T療法中積累了較多CMC以及臨床經(jīng)驗，也成為當(dāng)前體內(nèi)CAR-T開發(fā)的熱門選擇，進(jìn)度最快。
Interius、Umoja、EsoBiotec等全球第一梯隊選手，均為慢病毒玩家。
2024年1月，Umoja宣布與艾伯維達(dá)成兩項獨(dú)家選擇權(quán)和許可協(xié)議，交易總額超14億美元。其中之一是為艾伯維提供了獨(dú)家選擇權(quán)，以許可Umoja的靶向CD19的體內(nèi)CAR-T候選藥物UB-VV111；其二是艾伯維提供多達(dá)四種額外CAR-T候選藥物的選擇權(quán)。半年后，Umoja宣布FDA已批準(zhǔn)UB-VV111的IND，用于治療血液惡性腫瘤。
2024年6月11日，發(fā)表在Blood 雜志上的研究顯示，在未進(jìn)行化療清淋的情況下，將VivoVec顆粒（VivoVec particles, VVP）注射到非人類靈長類動物體內(nèi)后，導(dǎo)致了CD20 CAR-T細(xì)胞的大量產(chǎn)生，B細(xì)胞完全耗盡持續(xù)時間超過10周。這些數(shù)據(jù)支持VivoVec平臺的進(jìn)一步臨床開發(fā)。
VivoVec與RACR/CAR是Umoja有兩大技術(shù)平臺。前者是一種生成VivoCAR T細(xì)胞的體內(nèi)工程平臺，使用一種獨(dú)特的慢病毒載體包膜來促進(jìn)T細(xì)胞的體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)。VivoCAR T細(xì)胞是通過淋巴系統(tǒng)在體內(nèi)生成的抗癌細(xì)胞，通過RACR/CAR系統(tǒng)進(jìn)行基因重組。
其技術(shù)平臺已經(jīng)進(jìn)行了臨床前的驗證。結(jié)果顯示T細(xì)胞共刺激分子可以增強(qiáng)VivoVec粒子與T細(xì)胞結(jié)合、活化與轉(zhuǎn)導(dǎo)，促使生成更多CAR-T細(xì)胞并增強(qiáng)體內(nèi)抗腫瘤活性，MDF設(shè)計還可以可大幅降低給藥劑量，提高安全性。
近期，在CAR-T領(lǐng)域勢頭正盛的傳奇生物，也在最新的財報電話會議中透露其體內(nèi)CAR-T的布局，同樣為慢病毒路線。
根據(jù)公司介紹，這是一個已布局兩年的平臺，使用分子工程納米病毒，可以特異性識別患者體內(nèi)的免疫細(xì)胞（T細(xì)胞）；同時也設(shè)計病毒以減少對正常組織的通用或非特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)，預(yù)計今年6月和7月會有第一例患者服用，并在今年年底獲得初步臨床結(jié)果。
慢病毒載體之外，基于LNP載體的體內(nèi)CAR-T也在加速發(fā)展。
相比之下，理論上納米載體的遞送安全性更優(yōu)。這主要是因為其CAR表達(dá)具有瞬時性且通常不轉(zhuǎn)導(dǎo)至目的細(xì)胞基因組中。
早在2017年，就有研究團(tuán)隊報告了基于納米顆粒載體可以驅(qū)動小鼠B細(xì)胞耗竭，而后基于mRNA新冠疫苗的成功，極大提高了LNP系統(tǒng)的知名度，包括Capstan、Orbital在內(nèi)的biotech公司也抓住了體內(nèi)CAR-T的機(jī)會。
Ensoma開發(fā)了一種病毒樣顆粒Engenious?平臺，可以遞送高達(dá)35千堿基對的包裝DNA基因材料，是AAV載體上限的七倍以上。Capstan利用mRNA-LNP平臺，在心臟病小鼠模型中成功制造了體內(nèi)CD5特異性CAR T細(xì)胞。
Capstan使用靶向CD5離子化脂質(zhì)納米粒子（CD5/LNP）包裹針對成纖維細(xì)胞激活蛋白的CAR mRNA分子,在LNP注射后48小時，一個新的CAR-T細(xì)胞亞群出現(xiàn)了，占總T細(xì)胞群的20%。
去年3月，Capstan完成了1.75億美元的B輪融資，投資者陣容豪華，包括強(qiáng)生、BMS、禮來、拜耳、諾華、輝瑞等大藥企。顯然，業(yè)內(nèi)對其技術(shù)寄予厚望。
Capstan表示，裝載mRNA的LNP的一大優(yōu)勢是其可調(diào)性。這類療法只是讓T細(xì)胞暫時表達(dá)B細(xì)胞殺傷CAR，因此，劑量調(diào)整和重復(fù)用藥可以最大限度地提高療效同時最小化長期安全問題。此外，LNP比慢病毒載體更容易生產(chǎn)制造，在成本和復(fù)雜性方面，相比整個病毒，生產(chǎn)LNP和mRNA要容易得多。
當(dāng)然，一切還有待臨床的驗證。
03 在挑戰(zhàn)中前進(jìn)
盡管技術(shù)前景可期，過去兩年，體內(nèi)CAR-T研發(fā)也取得了一些實質(zhì)性進(jìn)展，然而，作為一種前沿技術(shù)，體內(nèi)CAR-T仍面臨諸多挑戰(zhàn)。
比如，如何確保足夠數(shù)量的目標(biāo)細(xì)胞被成功改造？如何避免脫靶效應(yīng)？體內(nèi)直接進(jìn)行基因編輯/表達(dá)，長期安全性、免疫原性、潛在的基因毒性等，也都需要嚴(yán)密監(jiān)控和評估。
作為一種新型體內(nèi)基因療法，其在臨床中的療效及安全性問題，備受重視。
正如前文所說，體內(nèi)CAR-T療法的一個主要問題是如何有效地將CAR轉(zhuǎn)基因遞送到體內(nèi)的目標(biāo)T細(xì)胞中。病毒載體可以促進(jìn)細(xì)胞攝取和核穿透，然而，直接向患者注入攜帶CAR構(gòu)建物的病毒載體，其靶向能力有限；這種方法也帶來了脫靶風(fēng)險，其他細(xì)胞類型可能被轉(zhuǎn)染。
脫靶風(fēng)險，也是監(jiān)管機(jī)構(gòu)重點(diǎn)關(guān)注的。
納米載體平臺相比病毒載體，相關(guān)的風(fēng)險和生產(chǎn)成本較低，似乎更適合于體內(nèi)靶向T細(xì)胞，但還需要額外的研究來提高這些納米粒子在生物環(huán)境中的穩(wěn)定性和生物相容性，以防止它們在到達(dá)并靶向T細(xì)胞之前，在體內(nèi)被降解和產(chǎn)生潛在的不良反應(yīng)。
當(dāng)然，其載體制備的工藝復(fù)雜性更高；有限的轉(zhuǎn)染效率，如基于mRNA的瞬時CAR-T，療效的持久性仍需要驗證。
與此同時，體內(nèi)CAR-T的免疫原性也需要考慮，由于體內(nèi)CAR-T療法無需且不能清淋，因此保留了患者功能齊全的免疫系統(tǒng)，但這也可能導(dǎo)致對載體的“排斥”。
與傳統(tǒng)CAR-T相比，體內(nèi)CAR-T的臨床試驗設(shè)計更復(fù)雜，不僅需要遞送技術(shù)更進(jìn)一步提升，監(jiān)管政策尚需進(jìn)一步完善，來實現(xiàn)創(chuàng)新與風(fēng)險控制的平衡。
當(dāng)然，無論如何，隨著技術(shù)的發(fā)展，一場細(xì)胞治療領(lǐng)域的深刻變革正在悄悄醞釀。
這代表著細(xì)胞治療發(fā)展的一大重要方向，并且，體內(nèi)CAR-T不僅有望改進(jìn)現(xiàn)有腫瘤適應(yīng)癥的治療，還有潛力開拓更多戰(zhàn)場，實體瘤、自免。有研究顯示，體外CAR-T通過殺死B細(xì)胞可以誘導(dǎo)免疫重置并可能治愈狼瘡。
Interius優(yōu)先推進(jìn)一款CD19靶向體內(nèi)CAR–T在2025年開展治療自免疾病的臨床研究；Umoja及其合作伙伴馴鹿生物計劃在中國的自身免疫性疾病患者中開始測試一種靶向CD22的候選體內(nèi)CAR-T；Umoja也計劃探索UB-VV200與UB-TT170聯(lián)用，應(yīng)用于卵巢癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、三陰性乳腺癌和非小細(xì)胞肺癌等多種病癥。
盡管技術(shù)仍在早期驗證階段，后續(xù)挑戰(zhàn)重重，但近兩年的爆發(fā)已經(jīng)表明，這場變革不再停留于紙面。